Kıymadan Escherichia Coli İzolasyonu ve Antibiyotik Direnç Profillerinin Araştırılması

Abstract

Antibiyotik direnci, dünya çapında önemli bir halk sağlığı sorunu olup, Escherichia coli suşlarının gıda kaynaklı patojen olarak rolü giderek artmaktadır. Buçalışmada, Kırşehir ilindeki yerel market ve kasaplardan toplanan 100 adet kıyma örneğinden 30 adet E. coli izolatı elde edilmiştir. Örneklerin ön zenginleştirmesi TSB besiyerinde yapılmış ve izolasyonlar MacConkey ve EMB agarlarda gerçekleştirilmiştir. İzolatların E. coli olduğu, fizyolojik ve biyokimyasal testler (indol, metil red, Voges-Proskauer, Simmons sitrat) ve Gram boyama ile doğrulanmıştır. Kesin tanı için iseMALDI-TOF MS yöntemi kullanılmış ve tüm izolatlar (%100) E. coli olarak tanımlanmıştır.Elde edilen izolatlarda proteaz ve lipaz aktiviteleri test edilmiş, bazı izolatların bu enzimleri ürettiği bulunmuştur. Hemoliz testlerinde izolatların %46.7’sikanlı agarda hemolitik aktivite göstermiştir. Antibiyotik duyarlılık testlerinde tümizolatlar ampisiline dirençli bulunmuş, bazı izolatlar diğer antibiyotiklere karşı ortaduyarlılık veya direnç göstermiştir. MAR indeksi analizleri, bazı izolatların çoklu antibiyotik direnci (MDR) taşıdığını ortaya koymuştur. Biyofilm testlerinde 30 izolatın14’ünde (%46.7) biyofilm oluşumu gözlenmiş, bunların bazıları güçlü, bazıları orta vezayıf biyofilm geliştirmiştir. UV-VIS spektrofotometrik yöntemle yapılan biyofilmanalizinde seçilen 5 izolatın tamamı biyofilm pozitif bulunmuştur. Sitotoksisitetestlerinde Artemia salina larvaları farklı E. coli konsantrasyonlarına maruz bırakılmış veLC50 değerleri 23.00 – 129.37 μg/mL aralığında dağılmaktadır. Patojenite testleri ise%100 mortaliteye yol açarken, larvalarda morfolojik ve fizyolojik bozulmalar tespit edilmiştir. Bu bulgular, kıymadan izole edilen E. coli suşlarının antibiyotik dirençli, enzim üretici, biyofilm oluşturabilen ve yüksek patojeniteye sahip olduğunu göstermekte;halk sağlığı açısından taşıdığı riski ve antibiyotik direnç profillerinin izlenmesinin önemini ortaya koymaktadır.